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石蠟切片粘附載玻片的處理

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石蠟切片粘附載玻片的處理

發布日期:2015-05-13 00:00 點擊:

    石蠟切片粘附載玻片的處理

    1、載玻片的處理:

    抗原修復過程中,由于高溫、高壓、輻射等諸多因素的影響,極易造成脫片。為保證試驗的正常進行,可選用我公司提供的zli-9001 apes、zli-9003 histogriptm或zli-9005 poly-l-lysine等幾種試劑,對已清洗的載玻片進行處理。具體方法如下:elisa試劑盒

    1.1 apes:現用現配。將洗凈的玻片放入以1:50比例丙酮稀釋的apes中,停留20~30秒鐘,取出稍停片刻,再入純丙酮溶液或蒸餾水中涮去未結合的apes,置通風櫥中晾干即可。用此載玻片撈片時應注意組織要一步到位,并盡量減少氣泡的存在,以免影響染色結果。

    1.2 histogriptm:將洗凈的玻片放入以1:50比例丙酮稀釋的histogrip液中,停留1~2分鐘,然后用雙蒸水快速清洗三次,室溫干燥或60oc烤箱烘烤一小時,裝盒備用。

    1.3 poly-l-lysine:將洗凈、干燥的載玻片放入以1:10比例去離子水稀釋的多聚賴氨酸溶液中,浸泡5分鐘,60oc烤箱烘烤一小時或室溫過夜干燥。裝盒備用。試驗中使用的器具均為非玻璃制品。elisa試劑盒

    2、常用酶消化:

    2.1 胰蛋白酶:一般使用濃度為0.05%~0.1%,消化時間為37℃、10~40分鐘,主要用于細胞內抗原的顯示。

    2.2 胃蛋白酶:一般使用濃度為0.4%,消化時間為37℃、30~180分鐘,主要用于細胞間質抗原的顯示,如:laminin(層粘蛋白),collagen iv(iv型膠原)等。

    2.3 皂素(saponin):一般使用濃度為2~10 g/ml的saponin溶液,消化時間為室溫孵育30分鐘。



粘附載玻片


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